FDA注册号:
3010704506
它是原生质体制备提取实验老搭档
发布时间:
2021-11-24
概要:
原生质体制备提取实验不能缺少老搭档——离心机,它可以说是原生质体制备提取实验必备仪器了。
原生质体制备提取作用有五点:
1.细胞融合。
2.原生质体中进行瞬时表达:亚细胞定位,蛋白和核酸相互作用。
3.利用膜片钳技术研究离子通道及原生质体在受光、胁迫和激素作用后的调节机制的研究。
4.细胞壁再生、细胞分裂与分化、摄入细胞器、病毒侵染机理、膜透性及离子转运等基础理论研究的理想材料。
5.被用来作为研究植物细胞钙信号转导及其调节机制的理想材料。
由此可见原生质体纯化的重要性。下面以植物为例,进行简单讲解:
纤维素酶和果胶酶能分解植物细胞壁,形成原生质体;加入0.6mol/l甘露醇的目的是维持原生质体正常的形态,防止原生质体吸水胀破;不同植物细胞结构不同,则原生质体结构不同;原生质体的结构由细胞膜、细胞质和细胞核组成。
将酶解后的组织液过尼龙网膜,去除未充分消化的组织碎片,选择与原生质体等渗的buffer清洗原生质体两次,离心去除碎片(一般采取50-100 g,离心机离心1-2 min左右),最后将原生质体重悬于适当浓度甘露醇中??刹慰家韵路椒ɡ唇档驮侍逍褐械乃槠急龋?/p>
1. 提前优化样本,比如剥去外皮(仅限于研究对象不包含外皮部分的样本)、弃去质地坚硬的组织和损伤组织。
2. 降低离心机离心转速和时间,去除留在上清中的碎片。
3. 如果原生质体起始量足够大,可考虑通过流式分选去除碎片。
以上就是关于离心机在原生质体制备提取实验中的应用,如果您还想了解更多有关离心机的信息,可以多多关注上海卢湘仪离心机仪器有限公司。
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